Enzimologie specială

Curs
8/10 (1 vot)
Conține 11 fișiere: doc
Pagini : 91 în total
Cuvinte : 23805
Mărime: 631.38KB (arhivat)
Cost: Gratis
Profesor îndrumător / Prezentat Profesorului: Pele Florentina
Acestea sunt suporturi de curs cuprinzand materiale ce pot folosii oricarei persoane ca vrea sa se initieze in domeniul enzimologiei.

Extras din document

3.2 Imobilizarea enzimelor prin reticulare.

Imobilizarea enzimei se poate realiza şi fără a se utiliza suporturi prin efectuarea de punţi covalente cu ajutorul unor reactivi polifuncţionali. Se obţin astfel structuri cu înaltă masă moleculară care devin insolubile. Pentru realizarea unei astfel de reacţii se pot folosi numeroşi reactivi, dintre care cei mai utilizaţi sunt :

Principalii reactivi polifuncţionali

Nume Structură

Glutaraldehidă

Acid bis-diazobenzidin-2,2’-disulfonic

Acid difenil-4,4’-diizotiocianat-2,2’-disulfonic

1,5-difluoro-2,4-dinitro-benzen

3-metoxi-4,4’-difenil diizotiocianat-metan

De departe glutaraldehida este reactivul cel mai utilizat nu numai pentru a se reticula enzimele ci şi pentru realizarea aşa numiţii imuno-adsorbanţi.

În acest proces enzima este diluată cu o proteină inertă, cum este albumina, pentru a se limita fenomenele de denaturare şi a creşte eficacitatea metodei de imobilizare. Derivaţii rezultaţi pot fi şi sub formă de membrane. Observaţii la microscopul electronic au permis precizarea structurii fine a acestor tipuri de derivaţi.

Pentru obţinerea unor derivaţi cu o structură foarte poroasă asemănătoare bureţilor, amestecul de enzimă, albumină şi glutaraldehidă este congelat rapid după care se creşte temperatura până la 40C în mod lent.

Un astfel de proces de reticulare se poate aplica nu numai enzimelor ci şi celulelor întregi. Acestea prezintă avantajul, mai ales în cazul în care celula conţine o enzimă uşor accesibilă (cum este cazul enzimelor periplasmatice), că permit utilizarea activităţii catalitice fără a se efectua procesele de extracţie şi purificare consumatoare de energie, timp şi bani. În acest caz putem spune că celula este suportul. De asemenea se evită eliberarea sistemelor care determină autodegradarea celulară printr-o încălzire a sistemului timp scurt la o temperatură de 700- 800C. În plus acest procedeu permite scăderea importantă a costului enzimei imobilizate şi este utilizat pe larg pentru imobilizarea glucoz izomerazei folosită pentru producerea de izoglucoză, una dintre cele mai importante aplicaţii industriale de enzime imobilizată.

De exemplu cu glutaraldehidă firma NOVO a reticulat Bacillus coagulans, iar GIST-BROCADES micelii de Actinoplanes missouriensis.

Avantaje şi dezavantaje

Avantaje

- Soliditatea legăturii enzimă –suport care permite obţinerea de compuşrezistenţi la diferite variaţii importante ale condiţiilor de mediu (pH, tărie ionică) şi, în particular, la spălări repetate cu soluţii concentrate de clorură de sodiu.

- Există o foarte mare varietate de suporturi şi metode de activare, deşi este aproape imposibil de a prevedea a priori eficacitatea unei metode de imobilizare, este întotdeauna posibil să se găsească pentru o enzimă dată o metodă care să dea un randament de imobilizare bun.

- Stabilitatea legăturilor covalente între enzimă şi suport se poate traduce şi prin rigidificarea structurii tridimensionale a enzimei. Din aceasta rezultă noi proprietăţi, în special printr-o creştere generală a rezistenţei la factorii de denaturare(temperatură, pH, agenţi denaturanţi). Este semnificativ că foarte multe enzime imobilizate prezintă o temperatură optimă de activitate mai mare decât a enzimei libere fapt deosebit de important pentru utilizarea enzimei în flux continuu. Pentru ca rigidificarea enzimei să nu fie totală, fiind necesară o anumită elasticitate, este obligatoriu să se stabilească condiţiile optime de imobilizare pentru fiecare enzimă în parte şi pentru fiecare procedură de imobilizare.

Dezavantaje

- Imobilizarea prin legare covalentă este mult mai complexă decât prin incluziune sau adsorbţie. Chimia heterogenă aplicată pentru a se ajunge la imobilizare nu duce întotdeauna la rezultatele aşteptate considerând reacţiile care au loc în fazele omogene ca urmare a fenomenelor de interferenţă din micromediul înconjurător prezent în sistemele heterogene.

- Formarea legăturilor covalente între diferitele grupări funcţionale ale enzimei şi suportului conduce la o importantă modificare a structurii enzimei, care deşi este benefică în ceea ce priveşte ameliorarea rezistenţei la factori de denaturare, provoacă totuşi o denaturare a structurii moleculei enzimei. De aceea randamentul de imobilizare exprimat în funcţie de activitatea enzimatică reziduală poate avea valori procentuale de la câteva unităţi la mai mult de 90%. De exemplu este suficient ca la legătură să participe şi grupări din situsul catalitic al enzimei ca activitatea sa să fie perturbată. De asemenea pot fi amintite şi efectele de stânjenire sterică şi de schimbare a sensibilităţii enzimei la variaţii de pH saiu chiar la modificarea valorii optime de pH.

Preview document

Enzimologie specială - Pagina 1
Enzimologie specială - Pagina 2
Enzimologie specială - Pagina 3
Enzimologie specială - Pagina 4
Enzimologie specială - Pagina 5
Enzimologie specială - Pagina 6
Enzimologie specială - Pagina 7
Enzimologie specială - Pagina 8
Enzimologie specială - Pagina 9
Enzimologie specială - Pagina 10
Enzimologie specială - Pagina 11
Enzimologie specială - Pagina 12
Enzimologie specială - Pagina 13
Enzimologie specială - Pagina 14
Enzimologie specială - Pagina 15
Enzimologie specială - Pagina 16
Enzimologie specială - Pagina 17
Enzimologie specială - Pagina 18
Enzimologie specială - Pagina 19
Enzimologie specială - Pagina 20
Enzimologie specială - Pagina 21
Enzimologie specială - Pagina 22
Enzimologie specială - Pagina 23
Enzimologie specială - Pagina 24
Enzimologie specială - Pagina 25
Enzimologie specială - Pagina 26
Enzimologie specială - Pagina 27
Enzimologie specială - Pagina 28
Enzimologie specială - Pagina 29
Enzimologie specială - Pagina 30
Enzimologie specială - Pagina 31
Enzimologie specială - Pagina 32
Enzimologie specială - Pagina 33
Enzimologie specială - Pagina 34
Enzimologie specială - Pagina 35
Enzimologie specială - Pagina 36
Enzimologie specială - Pagina 37
Enzimologie specială - Pagina 38
Enzimologie specială - Pagina 39
Enzimologie specială - Pagina 40
Enzimologie specială - Pagina 41
Enzimologie specială - Pagina 42
Enzimologie specială - Pagina 43
Enzimologie specială - Pagina 44
Enzimologie specială - Pagina 45
Enzimologie specială - Pagina 46
Enzimologie specială - Pagina 47
Enzimologie specială - Pagina 48
Enzimologie specială - Pagina 49
Enzimologie specială - Pagina 50
Enzimologie specială - Pagina 51
Enzimologie specială - Pagina 52
Enzimologie specială - Pagina 53
Enzimologie specială - Pagina 54
Enzimologie specială - Pagina 55
Enzimologie specială - Pagina 56
Enzimologie specială - Pagina 57
Enzimologie specială - Pagina 58
Enzimologie specială - Pagina 59
Enzimologie specială - Pagina 60
Enzimologie specială - Pagina 61
Enzimologie specială - Pagina 62
Enzimologie specială - Pagina 63
Enzimologie specială - Pagina 64
Enzimologie specială - Pagina 65
Enzimologie specială - Pagina 66
Enzimologie specială - Pagina 67
Enzimologie specială - Pagina 68
Enzimologie specială - Pagina 69
Enzimologie specială - Pagina 70
Enzimologie specială - Pagina 71
Enzimologie specială - Pagina 72
Enzimologie specială - Pagina 73
Enzimologie specială - Pagina 74
Enzimologie specială - Pagina 75
Enzimologie specială - Pagina 76
Enzimologie specială - Pagina 77
Enzimologie specială - Pagina 78
Enzimologie specială - Pagina 79
Enzimologie specială - Pagina 80
Enzimologie specială - Pagina 81
Enzimologie specială - Pagina 82
Enzimologie specială - Pagina 83
Enzimologie specială - Pagina 84
Enzimologie specială - Pagina 85
Enzimologie specială - Pagina 86
Enzimologie specială - Pagina 87
Enzimologie specială - Pagina 88
Enzimologie specială - Pagina 89
Enzimologie specială - Pagina 90
Enzimologie specială - Pagina 91

Conținut arhivă zip

  • Enzimologie Speciala
    • curs xiii.doc
    • curs xiv.doc
    • curs xix.doc
    • curs xv.doc
    • curs xvi.doc
    • curs xvii.doc
    • curs xviii.doc
    • curs xx.doc
    • curs xxi.doc
    • curs xxii.doc
    • curs xxiii.doc

Alții au mai descărcat și

Chimie organică

1.1 OBIECTUL CHIMIEI ORGANICE Obiectul de studiu al chimiei organice il reprezinta: -Izolarea si purificarea substantelor organice naturale sau...

Curs de Biochimie

Biochimia este o ştiinţă modernă, cu caracter complex, care are drept material de studiu materia vie şi fenomenele specifice acesteia, din punct de...

Cristalizarea și Sublimarea

1.Denumirea lucrării Sublimarea acidului benzoic 1. Modul de lucru Se ia 1 g de acid benzoic cu impurităţi, se mărunţeşte bine, se pune într-un...

Enzime

Enzime -compuşi macromoleculari de natură proteică, produşi şi prezenţi numai în organismele vii, -rol de biocatalizatori ai tuturor...

Produse Odorante și Aromatizante

Metaboliti primari si secundari II Produse odorante si aromatizante Introducere Interesul oamenilor pentru arome şi parfumuri nu s-a pierdut...

Tehnologia cărnii

Capitolul „Transformări biochimice a cărnii” Tema: Mecanismul rigidităţii musculare după asomare După asomarea animalului se întrerupe...

Aditivi alimentari

Directiva "cadru", nr. 89/107/EEC - stabileşte măsuri de siguranţă şi autorizare a aditivilor alimentari - listează categoriile de aditivi...

Ceramici Nanostructurate din BaTiO3

Titanatul de bariu (BaTiO3) este un material ceramic foarte versatil pentru fabricarea diferitelor sisteme electronice, de ex. sisteme de încălzire...

Te-ar putea interesa și

Procese Chimice și Enzimologice ce Intervin în Procesarea Cărnii de Porc în Vederea Obținerii Specialităților Afumate

MEMORIU TEHNIC Industria cărnii cuprinde o varietate de sortimente de produse din carne, dintre care afumăturile pot ocupa un rol important. Prin...

Biotehnologii Farmaceutice

CAPITOLUL I. AGENŢI BIOLOGICI UTILIZAŢI ÎN BIOTEHNOLOGIILE FARMACEUTICE Nomenclatorul agenţilor biologici utilizaţi în biotehnologie se extinde...

Enzime din clasa hidrolazelor

Aspecte generale privind enzimele Enzimele sunt substanţe chimice complexe de natură organică, proteine colidal-solubile elaborare de plante,...

Telomeraza

Introducere Considerată astăzi de mulți specialiști ca știință de sine stătătoare, enzimologia arenumeroase implicații practice în cele mai...

Metabolismul Intermediar al Proteinelor și Lipidelor

Proteinele repr ¼ masa corporala in produsele sintezei de proteinesunt fol aminoacizi de provenienta alimentara si cei formati in org din...

Enzimologie Specială

BIOSENZORI Un biosenzor este un instrument analitic care transforma un raspuns biologic intr-un semnal electric. Termenul de „biosenzor“ este...

Enzimologie Aplicată

Introducere Considerată astăzi de mulţi specialişti ca ştiinţă de sine stătătoare, enzimologia are numeroase implicaţii practice în cele mai...

Managementul cercetării și management industrial

Curs I DE LA AVENTURA CUNOAŞTERII LA RECREAREA LUMII “Pericolul nu provine de la ceea ce nu cunoaştem, ci de la ceea ce cunoaştem insuficient.”...

Ai nevoie de altceva?