Laboratoare biochimie fizică

Laborator
7.3/10 (4 voturi)
Conține 4 fișiere: doc
Pagini : 13 în total
Cuvinte : 3749
Mărime: 75.98KB (arhivat)
Cost: Gratis
1. Determinarea Constantelor de Echilibru in Sisteme Acid - Baza 2. Determinarea prin Chemiluminescenta a Activitatii Pro si Antioxidante a Biomoleculelor 3. Dotarea Catalizei 4. Stingerea Fluorescentei unei Solutii de Fluoresceina prin Ioni de Iod

Extras din document

Notiuni teoretice

În sistemele acid – baza conjugate, echilibrul de ionizare se poate reprezenta prin schema:

HA H+ + A-

iar constanta de echilibru se mai numeste si constanta de aciditate:

(1)

Pentru a exprima gradul de ionizare al acizilor si bazelor în aceeasi scara, asa cum valoarea pH-ului caracterizeaza si bazicitatea si aciditatea, Brönsted (1923) a introdus pentru ionizarea bazelor un formalism analog:

BH+ B + H+

(2)

Întrucât constantele de ionizare au în general valori mici, practic se folosesc logaritmi lor

cu semn schimbat: pKa = - logKa

Ecuatiile (1) si (2) se pot scrie deci în forma:

(3)

(4)

Pentru determinarea valorii pKa pe cale spectrofotometrica se înregistreaza spectrele de absorbtie ale substantei studiate într-o serie de solutii tampon cu diferite pH-uri, în care suma concentratiilor speciilor HA si A- este constanta. În aceste conditii:

unde EA si EHA - extinctia solutiei care contine numai forma A- sau HA (la pH-uri limita)

E - extinctia solutiei de analizat care contine ambele forme.

înlocuind în relatia (1) se obtine:

(5)

sau în forma logaritmica:

(6)

Din ecuatia (3) rezulta ca la ½pH - pKa½ = 2 în solutie exista 99% din una din formele acid - baza conjugate si 1% din cealalta. Întrucât masuratorile spectrofotometrice au o precizie de cca 1%, se poate considera ca tot intervalul de pH în care ionizarea produce variatii apreciabile în spectre se gaseste în limitele pKa ± 2. De aceea spectrul substantei în orice solutie cu pH ³ pKa + 2 poate fi considerat ca spectrul formei A-, iar în orice solutie cu pH £ pKa - 2, ca spectrul formei HA.

Metoda standard de determinare a valorii pKa cuprinde urmatoarele etape:

1. Trasarea spectrelor de absorbtie a celor doua forme acid - baza

Pentru aceasta se obtin spectrele substantei în solutii de HCl 0,1 N si 0,01 N si apoi de NaOH 0,01 N si 0,1 N care corespund la valorile de pH: 1; 2; 12; 13. Daca valoarea pKa a substantei se gaseste în limitele 4 - 10, atunci spectrele obtinute la pH 1 si 2 coincid si corespund formei HA pure, iar cele de la pH 12 si 13 - formei A-.

2. Alegerea lungimii de unda analitice din spectrele formelor acid - baza

În acest caz lungimea de unda analitica (la) va fi aceea la care diferenta între coeficientii molari de extinctie ai celor doua forme acid - baza este maxima. În continuare, toate masuratorile se vor face numai la aceasta lungime de unda, iar în calcule se vor folosi valorile EHA si EA obtinute la punctul 1 la la.

3. Metode standard de determinare a valorii pKa

Se foloseste o solutie de studiat în tampon la un astfel de pH încât în solutie sa existe formele HA si A- în concentratii comparabile. Se determina apoi extinctia solutiei la la si se calculeaza valoarea pKa aproximativa dupa ecuatia (6).

4. Determinarea exacta a valorii pKa

Cunoscând valoarea pKa aproximativa se pregatesc 6 - 8 solutii tampon cu valori de pH cuprinse în intervalul pKa ± 0,6. Determinând extinctiile acestor solutii la la se calculeaza valorile pKa (tot dupa ec. 6) si se ia media.

Modul de lucru

Se va determina constanta de aciditate a acridinei (C13H9N, M = 179,21).

Solubilitatea acridinei în apa la 20°C este de 3 ´ 10-4 M. Solutia cu o astfel de concentratie este prea diluata pentru determinarea valorii pKa pe cale potentiostatica. Constanta de aciditate a acridinei a fost determinata exact pe cale spectrofotometrica datorita faptului ca molecula neutra (baza libera B) prezinta o absorbtie puternica în domeniul ultraviolet si practic neglijabila în domeniul vizibil, în timp ce cationul (BH+) este colorat (având o banda caracteristica în vizibil).

Preview document

Laboratoare biochimie fizică - Pagina 1
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 2
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 3
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 4
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 5
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 6
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 7
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 8
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 9
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 10
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 11
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 12
Laboratoare biochimie fizică - Pagina 13

Conținut arhivă zip

  • Referate Biochimie Fizica
    • Determinarea constantei de echilibru in sisteme acid-baza.DOC
    • Determinarea prin chemiluminescenta.doc
    • Dozarea catalazei.DOC
    • Stingerea fluorescentei unei solutii de fluoresceina prin ioni de iod.doc

Alții au mai descărcat și

Fabricarea Drojdiei de Panificație

CAPITOLUL 1 MEMORIU JUSTIFICATIV Industria fermentativa ocupa un loc important în industria alimentara si contribuie, prin procesele sale...

Grăsimile

Grasimi Definitie: Grasimile sunt amestecuri de esteri simpli sau micsti ai glicerinei cu acizi grasi saturati sau nesaturati. În compozitia...

Calculare concentrație soluții

1. Notiuni teoretice: Solutii = amestecuri omogene de 2 sau mai multi componenti. • Cele mai simple solutii sunt cele bipolare (alcatuite doar...

Spectre de Absortie

1. Notiuni teoretice: • Spectrele (absortie sau emisie) pot fi utilizate pentru analiza calitativa si cantitativa a substantelor. Aceastra...

Separarea cromatografică pe strat subțire a unui amestec de coloranți

Scopul lucrarii: Lucrarea are ca scop alegerea unui solvent (sau a unui amestec de solventi) de elutie corespunzator pentru a realiza o separare...

Chimie UTCN

Pentru masurarea maselor se folosesc instrumente de masura a maselor si greutatilor. Cele mai cunoscute instrumente sunt balantele si cântarele....

Refractometrie

REFRACTOMETRIE GENERALITATI Refractia este fenomenul de schimbare a directiei de deplasare a unei raze luminoase atunci când se trece dintr-un...

Laboratoare chimie generală

1. Generalităţi Densitatea absolută, ρ, este raportul dintre masa unui corp, în vid, m, şi volumul său, V, la temperatura, t: ρ t = m/V În...

Te-ar putea interesa și

Îngrijirea pacientului cu hepatită virală de tip A

MOTTO ,,A DOBANDI VINDECAREA ESTE MAI PRESUS de ORICE IN STIINTA MEDICALA; MAI MULTE CAI INSA DUCAND CATRE ACEASTA TINTA TREBUIE SA O ALEGEM PE...

Tehnologia de Cultivare a Cartofului

IMPORTANŢA ŞI RĂSPÂNDIREA CARTOFULUI ÎN LUME ŞI ÎN ROMÂNIA Importanţă Cartoful este una din cele mai importante plante alimentare, industriale şi...

Nevoia de a evita pericolele

I.1. INTRODUCEREA ÎN PROFESIE Îngrijirea bolnavului se pierde în negura timpurilor, în trecutul îndepartat si mai aproape de noi în 1860, data...

Tehnologia laptelui și a produselor din lapte - smântână fermentată

Capitolul I Studii de literatura 1 Introducere 1.1 Scurt Istoric: Smantana fermentata. Cele mai vechi informatii despre productia de lapte si...

Îngrijirea bolnavilor cu rahitism

CAPITOLUL I ANATOMIA ŞI FIZIOLOGIA SISTEMULUI OSOS I.A Forma oaselor Oasele corpului omenesc au forme diferite, caracteristice. Luând în...

Genul Salmonella

Caracterizarea genului Salmonella 1. DEFINIŢIE, ÎNCADRARE. ISTORIC. Genul Salmonella aparţine familiei Enterobacteriaceae, regnul Procariota...

Proiect - Sauvignon

I. Întroducere. În ultimele 2-3 decenii viticultura şi vinificaţia mondială s-au confruntat cu unele elemente de criză determinate de apariţia...

Contabilitatea instituțiilor publice - Spitalul de Copii Sf Ioan, Galați

Prezentarea instituției Locația spitalului Spitalul Clinic de Urgenţă pentru Copii „Sf.Ioan’’ este situat in partea de sud a oraşului Galaţi pe...

Ai nevoie de altceva?