Microbiologie

2. LABORATORUL DE MICROBIOLOGIE - GENERALITATI

Laboratorul de microbiologie trebuie sa cuprinda doua compartimente:

- o sala de pregatire a mediilor si obiectelor de lucru si de decontaminare, continând mese, un autoclav, o etuva, un congelator si un frigider (care va fi utilizat si pentru pastrarea tulpinilor microbiene). Tot aici se poate stoca sticlaria, mediile de cultura precum si reactivii.

- o sala de lucrari propriu-zise, de manipulare a culturilor microbiene, la adapost de curentii de aer, dotata cu mese cu suprafata neteda, rezistenta, impermeabila, cu conducte de gaz si prize electrice, un sistem de vid si de aer comprimat si o hota sterilizabila, cu radiatii ultraviolete (eventual o hota cu flux laminar). În masura în care este posibil, în legatura cu aceasta sala, ar trebui sa existe anexe prevazute cu termostate la diferite temperaturi ( 250C, 300C, 370C, 440C, 550C).

Manipularile de culturi microbiene sau de produse susceptibile sa contina microorganisme se efectueaza tinând cont de unele tehnici particulare prin care sa se evite cele doua tipuri de contaminare:

1. contaminarea culturii sau a produsului ce trebuie analizat datorita personalului sau mediului inconjurator;

2. contaminarea personalului sau a mediului înconjurator de catre microorganismele studiate.

In laboratorul de microbiologie, operatia de baza este transferul de microorganisme dintr-un recipient în altul, lucrare ce se executa în zona sterila de protectie din jurul flacarii becului de gaz.

Sticlaria cel mai des utilizata în laboratorul de microbiologie consta în eprubete de diferite dimensiuni, flacoane Erlenmeyer, placi Petri, pipete Pasteur si pipete gradate. În ultima perioada sunt din ce în ce mai mult utilizate recipientele si pipetele din plastic, de unica folosinta. Pentru prelevarea si inocularea culturilor se utilizeaza ansa sau firul metalic, fabricate din nicrom. Ustensilele de etalare permit repartizarea uniforma a inoculului pe suprafata mediilor solidificate si pot fi fabricate prin îndoirea unui tub sau a unei baghete din sticla. În afara acestor ustensile curente de lucru, mai pot fi întrebuintate o serie de alte instrumente, în functie de operatia efectuata.

Laboratorul de microbiologie trebuie sa aiba în dotare urmatoarele aparate si echipamente:

- robinet cu apa calda si rece, de preferinta actionat cu piciorul;

- hota cu flux laminar sau nisa sterilizabila, indispensabila lucrarilor de microbiologie

- bec de gaz tip Bunsen pentru lucrul în zona sterila din jurul flacarii cu con albastru si pentru sterilizarea ansei

- etuva pentru sterilizarea sticlariei

- termostat bacteriologic pentru incubarea culturilor

- autoclav pentru sterilizarea mediilor de cultura si pentru decontaminarea obiectelor

- baie de apa termostatata

- frigidere pentru conservarea mediilor si a culturilor

- balante

- pH-metru

- microscoape

3. TEHNICI DE STERILIZARE A OBIECTELOR ÎN LABORATORUL DE MICROBIOLOGIE

Distrugerea microorganismelor sau sterilizarea este indispensabila pentru pregatirea materialului de lucru si a mediilor de cultura.

Un produs este considerat steril când nu mai contine forme de microorganisme ce pot fi revitalizate. Exista mai multe procedee de sterilizare care corespund diferitelor tipuri de materiale ce trebuie tratate. În laboratorul de microbiologie de analize de rutina, caldura reprezinta modalitatea de sterilizare cea mai întrebuintata.