Tehnici de biologie moleculară în analiza și epidemiologia enterovirusurilor

INTRODUCERE

Enterovirusurile reprezintă un gen foarte larg aparţinând familiei Picornaviridae. Virusurile cu ARN de polaritate pozitivă din această familie se remarcă prin faptul că sunt cele mai mici ribovirusuri cunoscute (picos = mic) si reprezintă patogeni importanţi pentru om şi zootehnie. Datorită importanţei economice şi medicale a picornavirusurilor studiul lor a adus o contribuţie substanţială la dezvoltarea virusologiei moderne.

Apartenenţa la grupul virusurilor ARN de polaritate pozitivă este justificată de faptul că genomul enterovirusurilor funcţionează ca ARN mesager şi prezintă o ARN replicază dependentă de ARN.

Numelele generic de enterovirusuri provine de la faptul că majoritatea colonizează tractul digestiv. Pe langă infecţii uşoare sau asimptomatice, cele 66 serotipuri de enterovirusuri umane cunoscute pana in prezent pot provoca şi infecţii foarte grave cum sunt meningitele aseptice sau miocardita acuta.

Clasificarea iniţiala a enterovirusurilor s-a bazat pe diferenţele antigenice, pe capacitatea de a se replica intr-o anumita linie celulară umană sau animală.

1. ÎNCADRARE TAXONOMICA

ETIOLOGIE

Enterovirusurile (E.V.) fac parte din familia PICORNAVIRIDAE (pico = foarte mic, RNA =tipul de acid nucleic), con in ARN, sunt icosaedrale, de aproximativ 30 nm diametru şi nu au anvelopă. Clasificarea enterovirusurilor în mai multe subgrupe se bazează pe diferenţe de patogenitate şi gazde, iar divizarea în serotipuri se face prin seroneutralizare:

Virusurile Poliomielitice - (V.P.)

Serotipurile 1-3 (tipul 1- Brunhilde; tipul 2 - Lansing; tipul 3 - Leon) cultivă în culturi celulare de primate.

Tipul 2 Lansing a fost adaptat la rozătoare. Provoacă leziuni histopatologice caracteristice prin inoculare directă în SNC la primate.

Virusurile Coxsackie sunt divizate în 2 grupuri:

Coxsackie grup A - produc la şoricelul inoculat miozita generalizată, cu paralizie flască şi cuprind serotipurile 1-24 (în prezent 23 serotipuri);

Coxsackie grup B - produc miozita focală, cu infecţie generalizată în miocard, pancreas, SNC cu paralizie spastică şi cuprind serotipurile 1-6;

Virusurile ECHO

Acestea produc efecte citopatice în culturi celulare de primate şi cuprind 31

serotipuri recunoscute. Iniţial au fost 34 serotipuri, însa în urma studiilor virusologice s-au restrâns la 31. Enterovirusuri nou descoperite au fost numerotate 68-72, cu excluderea virusului hepatitic A (enterovirus 72).

GENOMUL VIRAL

Genomul enterovirusurilor este constituit dintr-o moleculă de ARN monocatenar, de polaritate pozitivă, având aproximativ 7400 de nucleotide. ARN-ul viral, infectat, funcţionază ca ARN mesager în timpul translaţiei şi ca matriţă pentru formarea catenei complementare de polaritate negativă în timpul replicării genomului viral. Extremitatea 3’ a genomului este poliadenilată iar extremitatea 5’ este legată covalent cu o proteină de talie mică ( 22 de aminoacizi ), VPg, cu un rol important se pare în iniţierea sintezei ARN-ului. Molecula de ARN prezintă o singură fază de citire deschisă, ORF

(,, open reading frame’’), încadrată de două regiuni necodante. (NC) în 5’ şi 3’ (Rueckert, 1996)

( Figura 1)