Extracția Identificarea și Determinarea Cantitativa a Compusilor Aromatici

Identificarea produsilor chimici din tesuturile produselor vegetale se realizeaza prin reactii specifice de culoare sau precipitare. Pentru aceasta, se utilizeaza mai ales examenul histochimic si microsublimarea.

Examenul chimic

Permite identificarea compusilor chimici din tesuturi, prin reactii specifice. Examenul histochimic se efectueaza pe sectiuni, mai rar pe pulberi vegetale permitand totodata, identificarea principiilor active din produsele studiate. Produsele vegetale sunt astfel pregatite incat sa fi asigurata prezenta principiilor active in tesuturi, in general, aplicandu-se urmatorul process: se fierb fragmentele intr-o capsula de in solutie saturate de NaCl sau Na2SO4, pana la consistenta necesara sectionarii. Sectiunile ontinute, se aduc pe oe lama la microscop sau intr-un cristalizor, unde sunt acoperite cu reactivul necesar. Dupa cateva minute, sectiunile se spala cu solventul adecvat si sunt examinate la microscop pentru observarea tesuturilor si a celulelor si pentru a observa prezenta principiilor active, puse in evidenta de catre reactiv. Se intocmeste o schema a sectiunii in care se reprezinta si desenul detaliat al celulelor in care au fost identificate principiile active. Procedura este aceeasi si pentru pulberi, operatiunile fiind efectuate pe o lama de microscop. Reactivii folositi poate identifica o singura substanta sau o grupa intreaga de substante.

Microsublimarea

Este o metoda ce presupune separarea compusilor naturali din produsele vegetale cu conditia ca substantele respective sa aiba proprietatea de a sublima.

Tehnica de lucru presupune asezarea unei lame de microscop pe o sita de azbest, pe un bec de gaz, pe care se vor aduce cca. 0.10 g de produs vegetal pulverizat. La unul din capetele lamei se pune o bagheta din sticla, lunga de 5-6 cm si 5 mm in diametru, pe care se sprijina o lata lama de microscop. Pe lama superioara inclinata, se adduce un tampon de de vata imbibat cu apa ce are rol de refrigent. Se incalzeste sita de azbest cu un bec de gaz la flacara mica, situate la cca 10 cm de aceasta. Pe lama superioara, la in dreptul tamponului de vata, pot apara cristale de substante ce au sublimat. In analiza acestuia, se vor preciza aspectul, culoarea, sistemul de cristalziare, eventuala fluorescent in U.V, punctual de topire si apoi de efectuzeaza reactiile de identificare.

Examenul chimic calitativ al compusilor extrasi cu solvent

Folosind extractia cu solventi, poate fi stabilita comozitia chimica a a unei specii vegetale nestudiate. Separarea principalelor grupe de compusi naturali, se face prin extractive succesiva si selective a produsului vegetal cu solvent de particularitati diferite. Produsul vegetal trebuie extras cu un solvent nepolat – eter etilic, eter de petrol, benzen, hexan cloroform, etc., apoi cu un solvent polar – etanol, metanol si in cele din urma cu apa, obtinandu-se urmatoarele extracte:

1. Extractul eteric;

2. Extractul alcoolic;

3. Extractul apos;

In extractul eteric se gasesc compusi chimici lipofili iar in celelalte doua, compusi hidrofili.

Extractul Eteric

Dupa pulverizare si trecrea prin sita V, din 10-20 g de produs vegetal se extrag principiile cu eter etilic cu ajutorul unui apart Soxhlet sau prin agitare repetata, la temperatura camerei. Se repeta procedeul pana ce solutia extrasa nu mai prezinta reziduu la evaporare Extractele eterice reunite si filtrate se concentreaza in 50 ml, intr-un apart de distilat. Extractul final, contine:

- uleiuri volatile;

- substante grase;

- steroli;

- triterpene;

- carotenoide,

- acizi grasi si rezinici;

- alcaloizi baze;

- agliconi flavonoici;

- agliconi si antracenozide;

- cumarina si clorofila.