Analiza vinului

În acest studiu, a fost dezvoltată pentru analiza a cinci esteri organofosforici (OPEs) în probele de vin prin microextracția lichid-lichd combinată cu cromatografia lichidă de înaltă performanță în tandem cu spectometria de masă.

Esteri organofosfați (OPE) au fost aplicați pe scară largă. OPE clorurați, cum ar fi Tris (2-cloretil) fosfat (TCEP), tris (clorizopropil) Fosfat (TCPP) și tris (diclorpropil) fosfat (TDCP) sunt utilizați ca agenți care împiedică întreținerea flăcării. În comparație cu esterii nehalogenați OPE cum ar fi tris (2-butoxietil) fosfat (TBEP), tributil fosfat (TnBP), trifenil fosfat (TPhP) și tricresil fosfat (TCrP) sunt adăugate de obicei ca plastifianți în produse.

Esteri organofosfați (OPE) au fost aplicați pe scară largă datorită potențialelor riscuri de mediu ale unor eteri difenil polibromurați (PBDE), acești compuși au fost interziși pentru a fi utilizați în Uniunea Europeană din 2008 (Betts,2008). Ca urmare, OPE-urile devin acum o clasă importantă a produselor ignifuge dar și plastifianți ca alternativă a PBDE.

Utilizarea excesivă a OPE-urilor produc amenințări la adresa mediului și asupra sănătății umane. Există riscuri din cauza poluării cu OPE, cum ar fi carcinogenitatea, neurotoxicitatea, perturbarea endocrină și reprotoxicitatea.Deoarece OPE-urile sunt adesea adăugate fizic la produse, ele sunt susceptibile de a se elibera în mediu prin volatilizare, abraziune și dizolvare. Mai mult, unele OPE, în special OPE clorurate, s-au dovedit a fi persistente și toxice pentru mediul înconjurător dar și asupra sănătății umane.

Creșterea poluării a atras o atenție considerabilă, ceea ce a condus la adoptarea unor reglementări specifice de către Organizația Mondială a Sănătății în 2008 pentru a limita abuzul OPE.

În general, OPEs găsite în probe au fost prezente în concentrații scăzute, dar procesul de pretratare este essential pentru purificare înainte de a analiza instrumentală. Metode propuse pentru analiza OPEs:

- extracția în fază solidă (SPE),

- microe în fază solidă (SPME),

- extracție asistată cu ultrasunete și extracția cu microunde (MAE),

- extractia cu lichid sub presiune (PLE).

Cu toate acestea, SPE necesită de obicei un volum mare de probă și este susceptibilă la înfundare, SPME este consumatoare de timp, fibrele sunt prea fragile și alte metode necesită instrumente scumpe.

Microextracția lichid-lichid (DLLME) este o metodă de pretratare dar și de analiză a alimentelor.

Avantajele metodei:

- analiza în scurt timp,

- un cost redus

- utilizare redusă de solvenți organici.

Prin urmare, DLLME este o metoda promitatoare pentru analiza OPEs în diferite probe de alimente. Din cauza existentei acestor compuși, cercetatori deja au identificat prezența OPEs în laptele praf degresat și probele de pesti .

Cel mai recent, OPEs au fost găsite în probele de orez și de altealimente consumate în mod obișnuit, care indica ca orezul și alte plante pot absorbi și acumula OPEs de la sol. Prin urmare, materiile prime ar fi o importantă sursă potențială de OPEs în vinuri. În acest studiu, DLLME cuplată cu cromatografia lichidă de înaltă performanță în tandem cu spectometria de masă (uplc-ms/ms) a fost dezvoltat pentru analiza OPEs în probele de vin.Au fost selectate pentru determinarea nivelurilor de concentrație de OPEs trei probe de vin alb, două de vin roșu, și două probe de bere de diferite mărci.

2. Materiale și metode

2.1 Produse chimice și reactivi

Cele cinci standarde și un izotop stabil sunt enumerate în tabelul 1.

Acetonitril (ACN) metanolul și acetona au fost obținute de la Fisher Scientific (Shanghai, China). Tetraclorura de carbon și diclorura de cloroform au fost procurate la fel din China. Toate au fost de calitate.

Vinul alb, vinul roșu, și mostrele de bere din diferite mărci au fost achiziționate de la un supermarket din provincia Henan Zhengzhou (China).

2.2 Procedura de microextracție lichid-lichid

Ținta a fost de a extrage OPEs din probe cu ajutorul DLLME conform procedurilor.

Pe scurt, un mililitru de probă de vin a fost transferat într-o eprubeta de centrifugare de sticlă și apoi diluate cu apă ultra pură pâna la 10 mL.

Apoi, 10 μL de TnBP-d27 cu 5 mg/L apă ultra pură au fost omogenizate, urmată de adăugarea de 10 μL de soluție standard de evaluare a metodei propuse.

Se adaugă un amestec de ACN (800 μL) și de tetraclorură de carbon (50 μL) a fost rapid injectat în soluția de probă cu ajutorul unei seringi.

Soluția rezultată este ținută la temperatură ambiantă timp de 4 min și apoi se centrifughează timp de 6 min la 3000 rpm.

După separarea fazelor din soluția apoasă, faza de extracție a fost uscată cu ajutorul unui N- (Anpel EVAP, Shanghai, China) iar reziduul redizolvat era un amestec de ACN/apă.

Șapte μL de soluție finală a fost injectat în UPLC-MS/MS pentru analiză.

Toată sticlăria de laborator a fost spălată cu etanol absolut și încălzită peste noapte la 400 °C înainte de utilizare.

2.3. UPLC-MS/MS

Un sistem de UPLC (Ultimate 3000, Thermo stiintifice, SUA) echipat cu un spectrometru de masa triplu cu patru poli (TSQ Endura, Thermo stiintifice, SUA) a fost utilizat pentru determinarea și identificarea OPEs.

Separarea analiților a fost realizată cu ajutorul unui coloane Hypersil GOLD C18 (21 mm 50 mm, 1,9 μm). Pentru eluție, a fost aplicată o fază mobilă binară formată dintr-o soluție apoasă de 0,1% de acid formic (A) și ACN conținând 0,1% acid formic (B) la un debit de 0,3 mL/min .

Gradientul a fost setat după cum urmează: 0 min (40 % B), 0,5 min (40 % B), 3 min (50 % B), 4,5 min (55 % B), 8,5 min (70 % B), 9 min (100 % B), 13,8 min (100 % B), 13,9 min (40 % B) și 17 min (40 % B).