Extras din referat
CRISP/Cas
Tehnologie endonucelazica ghidată de ARN
inducerea mutațiilor indel
înlocuiri specifice de secvențe genice
inserții și deleții mari sau rearanjamente genomice
utilizată pentru medierea reglării unor gene endogene specifice
modificarea histonelor sau metilarea ADN-ului.
Cele mai bine caracterizate nucleaze asociate cu CRISPR
proteinele Cas9 - Streptococcus pyogenes și Staphylococcus aureus.
două noi nucleaze asociate cu CRISPR, Cpf1 (de la bacterii Lachnospiraceae și Acidaminococcus sp.).
CRISP/Cas - Principii
CRISP - Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats
Cas 9 - CRISPR associated protein 9
crRNA - CRISPR-RNAs
tracrRNA - trans-activating crRNA
crRNA cuprinde 20 nt din secventa spacer si 22 nt derivate din secventa repetitiva
Fiecare tracrRNA se hibridizeaza peste secventa repetitiva a crRNA (~74nt)
Complexul crRNA-tracrRNA recruteaza Cas9 (actiune nucleazica)
Cas9 recunoaste secventa PAM (protospacer adjacent motif - NGG pentru S. pyogenes) si cliveaza ADN intr-un situs adiacent regiunii PAM pe ambele catene
Conținut arhivă zip
- Sistemul de editare a genomului CRISPR - Cas.pptx