Extras din seminar
Transferul direct:
Transformarea mediată de PEG
Electroporarea
Transferul ADN via un purtător:
Bombardamentul cu microparticule
Transferul ADN via un vector:
Agrobacterium, virusuri
Succesul aplicării metodei depinde de:
regenerarea plantelor din protoplaşti;
sisteme eficiente de selecţie a celulelor transformate.
Transferul genelor prin electroporare
sau PEG este simplu şi eficient:
permite manipularea unui număr mare de celule;
pot fi obţinute mii de plante într-un experiment (sistemul model protoplaştii de tutun);
nu necesită echipamente speciale.
Frecvent se integrează copii multiple şi se produc rearanjamente
Integrarea se face la întâmplare
Nu exista tehnici eficiente de regenerare din protoplaşti la multe plante de cultură
Concentraţia ionilor de Ca şi de Mg în amestecul de incubare
Concentraţia ADN
Utilizarea unui ADN purtător inert
Greutatea moleculară şi concentraţia PEG
Raportul ADN/protoplaşti
Durata şi numărul impulsurilor electrice
Tensiunea folosită(200 - 600v)
Mediul utilizat
Concentraţia ADN plasmidial (1-10mg/ml)
Densitatea protoplaştilor
Dimensiunile şi configuraţia plasmidei (moleculele de ADN plasmidial lineare se integrează mai eficient decât ADN superrăsucit)
Conținut arhivă zip
- Metode de Transfer al Genelor.ppt